兒童呼吸道感染現(xiàn)狀
WHO的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，下呼吸道感染仍是世界上最致命的傳染病，位居全球主要死亡原因第四位[1]。全球194個(gè)WHO成員國(guó)2000年 ~ 2019年5歲以下兒童死亡原因分析顯示，下呼吸道感染是5歲以下兒童（新生兒除外）的首要死亡原因，中國(guó)是5歲以下兒童死亡病例數(shù)最高的10個(gè)國(guó)家之一[2]。
2019年全球5歲以下兒童死亡原因
呼吸道感染是兒科最常見(jiàn)的疾病之一，占所有兒科疾病首位。呼吸道感染病原譜呈現(xiàn)多樣化，臨床癥狀非特異。上呼吸道感染多由病毒引起，發(fā)病率高，多為自限性疾病，易引起多種并發(fā)癥；下呼吸道感染由病毒、支原體、衣原體、軍團(tuán)菌、細(xì)菌等微生物感染引起，發(fā)病率較上呼吸道感染低，但醫(yī)治費(fèi)用較高。呼吸道感染現(xiàn)狀，病原譜多樣且復(fù)雜，急性呼吸道感染90%以上為非細(xì)菌性，多為非典型性病原體，臨床癥狀非特異；非典型病原體具有感染力強(qiáng)、傳播快、潛伏期短、發(fā)病急、病后免疫力不能持久等特點(diǎn)，常導(dǎo)致較高的發(fā)病率和死亡率，造成疾病的大流行。不同病原感染，診療差異較大。針對(duì)不同的病原體，需采用不同的抗感染藥物。
兒童呼吸道檢測(cè)現(xiàn)狀
面對(duì)頻發(fā)的呼吸系統(tǒng)疾病，其致病微生物復(fù)雜多樣，但癥狀往往相似，有流涕、發(fā)熱、頭痛等癥狀，臨床病例為單一或復(fù)合感染，導(dǎo)致臨床癥狀與普通輔助檢查不具有特異性，不利于鑒別。
2023年12月，《發(fā)熱患兒就診流程規(guī)范化管理專家共識(shí)》(下稱《共識(shí)》)正式發(fā)布[8]，其提出發(fā)熱門(mén)診應(yīng)根據(jù)臨床診療和疫情防控要求合理開(kāi)展傳染病和兒科常見(jiàn)感染性疾病病原學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目，尤其是病原學(xué)快速檢測(cè)項(xiàng)目。需要重點(diǎn)關(guān)注的兒科急性感染常見(jiàn)病原體，包括：（1）易造成急性呼吸道感染高發(fā)流行的病原體，如甲型和乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、新冠病毒、偏肺病毒、副流感病毒及肺炎支原體等；（2）易造成急性病毒性感染腹瀉的高發(fā)流行病原體，如諾如病毒、輪狀病毒等。
《共識(shí)》將病原學(xué)快速檢測(cè)項(xiàng)目擺在了重要位置?？焖贆z測(cè)項(xiàng)目對(duì)于病毒檢測(cè)試劑的要求高，而多項(xiàng)病原體聯(lián)檢試劑產(chǎn)品能夠滿足于市場(chǎng)對(duì)于快速檢測(cè)的需要，同時(shí)呼吸道聯(lián)檢檢測(cè)試劑產(chǎn)品能夠縮短患者治療周期，更大程度避免抗生素的濫用。
常見(jiàn)檢測(cè)方法
傳統(tǒng)的檢測(cè)方法主要包括抗原檢測(cè)、抗體檢測(cè)、培養(yǎng)分離和核酸檢測(cè)等。這些方法各有優(yōu)勢(shì)，但也存在一定的局限性
核酸檢測(cè)有較高的靈敏性和特異性，受抗菌藥物應(yīng)用影響小，檢測(cè)窗口期短，速度快，尤其適用于傳染性病原體如病毒的核酸篩查，或難以培養(yǎng)的細(xì)菌（如結(jié)核分枝桿菌）和非典型病原體的檢測(cè)。核酸檢測(cè)技術(shù)還可以同時(shí)檢測(cè)多種病原體，提高了檢測(cè)效率和準(zhǔn)確性。
《兒童呼吸道感染病原體核酸檢測(cè)專家共識(shí)》表示：核酸檢測(cè)方法因具有較高的靈敏度和特異性，得以快速地臨床推廣應(yīng)用，成為呼吸道感染病原體診斷的主要方法[9]。
CRISPR技術(shù)的應(yīng)用
CRISPR技術(shù)在分子診斷領(lǐng)域的應(yīng)用，為兒童呼吸道感染病原體核酸快檢提供了新的解決方案。CRISPR（規(guī)律成簇的短回文重復(fù)序列）是一種在細(xì)菌和古菌中發(fā)現(xiàn)的天然免疫機(jī)制。我們前期文章也介紹了CRISPR系統(tǒng)基于Cas12或Cas13蛋白的反式剪切能力，已被用于開(kāi)發(fā)快速、靈敏的核酸檢測(cè)系統(tǒng)。這些系統(tǒng)不僅具有高特異性和靈敏度，而且操作簡(jiǎn)便，有望實(shí)現(xiàn)家庭自測(cè)。
在呼吸道感染領(lǐng)域中，通過(guò)設(shè)計(jì)特定的CRISPR系統(tǒng)，可以識(shí)別并剪切病原體特有的基因序列，且具有高特異性、快速檢測(cè)、操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn)，可以完成一個(gè)樣本同時(shí)檢測(cè)多種病原體，且適用于不同樣本類型，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)呼吸道感染病原體的快速、準(zhǔn)確檢測(cè)。
技術(shù)優(yōu)勢(shì)
高特異性：CRISPR系統(tǒng)可以針對(duì)特定的病原體設(shè)計(jì)，避免交叉反應(yīng)，提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
快速檢測(cè)：與傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法相比，CRISPR檢測(cè)可以在30min內(nèi)完成，大大縮短了等待時(shí)間。
操作簡(jiǎn)便：CRISPR診斷技術(shù)不需要復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，有望實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)及居家自測(cè)。
成本效益：與傳統(tǒng)的PCR技術(shù)相比，CRISPR技術(shù)減少了昂貴的設(shè)備投入和耗時(shí)的操作步驟，使得大規(guī)模篩查變得更加經(jīng)濟(jì)高效。
未來(lái)展望
呼吸道感染的聯(lián)檢技術(shù)正朝著更快速、更精準(zhǔn)、更經(jīng)濟(jì)的方向發(fā)展。CRISPR技術(shù)的應(yīng)用為呼吸道感染的診斷帶來(lái)了新的機(jī)遇，有望在未來(lái)進(jìn)一步提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性和效率，為臨床治療提供更有力的支持。CRISPR技術(shù)在呼吸道感染領(lǐng)域的應(yīng)用仍處于發(fā)展階段，但已顯示出強(qiáng)大的市場(chǎng)潛力。
1.家庭自測(cè)的便捷性：CRISPR快檢技術(shù)有望實(shí)現(xiàn)家庭自測(cè)，對(duì)發(fā)病急的患兒可快速了解健康狀況，并及時(shí)采取相應(yīng)措施。
2.基層醫(yī)療的強(qiáng)化：該技術(shù)的應(yīng)用還將強(qiáng)化基層衛(wèi)生防疫能力，提升醫(yī)療服務(wù)效率，尤其是在偏遠(yuǎn)地區(qū)和醫(yī)療資源匱乏的地區(qū)。
3.技術(shù)與服務(wù)的結(jié)合：隨著“互聯(lián)網(wǎng)+醫(yī)療”的發(fā)展，CRISPR核酸快檢技術(shù)可以與在線醫(yī)療服務(wù)相結(jié)合，提供一站式的健康管理解決方案。
未來(lái)，隨著技術(shù)的不斷成熟和優(yōu)化，相信CRISPR技術(shù)將在呼吸道感染的診斷和治療中發(fā)揮更加重要的作用，為全球公共衛(wèi)生事業(yè)做出更大的貢獻(xiàn)。
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[1]WHO Fact sheets, the-top-10-causes-of-death. 2020, Dec.
[2]Jamie Perin, et al. Global, regional, and national causes of under-5 mortality in 2000–19: an updated systematic analysis with implications for the Sustainable Development Goals[J]. Lancet Child Adolesc Health, 2022 Feb;6(2):106-115
[3]《流行性感冒診療方案 （2019年版）》
[4]《新型冠狀病毒感染診療方案 （試行第十版）》
[5]《中國(guó)兒童肺炎鏈球菌性疾病診斷、治療和預(yù)防專家共識(shí)》
[6]《兒童流感嗜血桿菌感染診斷及治療專家建議》
[7]《兒童肺炎支原體肺炎診療指南 （2023 年版）》
[8]《發(fā)熱患兒就診流程規(guī)范化管理專家共識(shí)》
[9]《兒童呼吸道感染病原體核酸檢測(cè)專家共識(shí)》
2022-07-15
2022-11-21
2022-11-23
2022-10-21
2022-03-29
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